一、噬菌體展示技術(shù)
噬菌體展示技術(shù) | |
服務(wù)編號 | CS601 |
將外源蛋白質(zhì)或多肽的基因表達(dá)產(chǎn)物與噬菌體衣殼蛋白融合,并在其表面展示,同時(shí)將其遺傳密碼信息整合到個(gè)體噬菌體的基因組中。這個(gè)技術(shù)的最大優(yōu)點(diǎn)是直接將可現(xiàn)的表達(dá)型與其基因型聯(lián)系在一起再利用其配體的特異性親和力將所感興趣的蛋白質(zhì)或多肽挑選出來。
二、篩選過程
將噬菌體展示文庫作為可溶相,而將與欲選擇的重組其因產(chǎn)物有特異性親和力的靶分子周定在一個(gè)固相載體上,洗去不能與固定相特異結(jié)合的文庫的大部分成員,將特異結(jié)合的成員洗脫下來,再進(jìn)一步擴(kuò)增,進(jìn)入下一輪淘選。
最常用的噬菌體:
溶源性的單鏈絲狀噬菌體(如M13、f1和£d)
噬菌體展示技術(shù)與傳統(tǒng)獲得抗體技術(shù)的比較:
三、噬菌體隨機(jī)肽庫
將化學(xué)合成的消機(jī)寡核苷酸序列與噬菌休表面蛋白基因融合,在噬菌休表面表達(dá)出各種氨基酸組合的隨機(jī)序列短肽。利用噬菌體展示隨機(jī)肽庫可以高通量篩選各種抗原的抗原表位。
四、基因工程抗體開發(fā)
免疫庫:
對于特定免疫抗原的抗體淘選的效率較高,但一般僅適用于一種特異性抗體的選擇,庫容量要求不高,一般106-8的庫容量就可滿足需要。
天然庫:
不用免疫動物。骨髓內(nèi)和骨髓外所有抗體基因都包含在內(nèi),所構(gòu)建的抗體庫適用于所有抗原所對應(yīng)的抗體的選擇,庫容量要求較高,最小需要達(dá)到109,因?yàn)槟壳肮浪愕淖匀唤绲目乖N類在這個(gè)數(shù)量級上。
種屬來源:
兔源,鼠源,人源
庫的類型:
scFv(由VH和VL組成,并由一個(gè)小肽(Gly4Ser)3連接成一個(gè)單鏈多肽)庫、Fab(含有VH-CH,VL-CL,并由二硫鍵連接在一起)庫和VHH(只有重鏈可變區(qū))庫。
五、噬菌體展示服務(wù)內(nèi)容
1.噬菌體展示抗體文庫構(gòu)建
2.噬菌體展示多肽文庫構(gòu)建
3.抗原表位篩選
4.抗體親和力成熟
5.抗體人源化
六、咨詢與訂購
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