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Benzonase是一種來源于Serratia Marcescen的基因工程酶。本品可將核酸降解成2-5個(gè)堿基的5‘單磷酸核苷酸，因其能高效降解任何形式（雙鏈，單鏈，線狀，環(huán)狀）的DNA和RNA而沒有蛋白裂解活性，又被稱為“全能核酸酶”。該酶可在廣泛的條件下能保持很高的穩(wěn)定性和消化活力，高效地降解所有形式的RNA和DNA，因此被廣泛用于去除生物制品中的核酸殘留和污染，提升樣本純度和制品生物功效。本品利用大腸桿菌(E.coli)大規(guī)模發(fā)酵表達(dá)純化，在科研與生產(chǎn)工藝中可降低細(xì)胞上清和細(xì)胞裂解液的粘度，能提高蛋白純化效率并用于后續(xù)功能研究。

產(chǎn)品名稱    Benzonase

來源 E. coli

分子量C 26.8 KD

等電點(diǎn) 6.39

蛋白純度    ≥ 95%(SDS-PAGE)

酶活 ≥ 250 U/μl

比活 ≥ 1.5×106U/mg 蛋白

最適pH 8.0

最適溫度 37℃

輔助因子 1 - 10 mM Mg2+

儲(chǔ)存緩沖液 20 mM Tris-HCl(25℃，pH 8.0)，2 mM MgCl2，20 mM NaCl and 50% Glycerol

活性單位定義 37℃，pH 8.0 反應(yīng)條件下，2.625 ml反應(yīng)體系中，在 30 min內(nèi)使△A260 吸收值變化 1.0 所用的酶量定義為一個(gè)活性單位(U)。(相當(dāng)于完全消化37 μg鮭魚精DNA的酶量）
標(biāo)簽：切除 C-terminal His Tag

-30 ~ -15℃保存，≤0°C運(yùn)輸。不建議長(zhǎng)期2 ~ 8℃儲(chǔ)存，如需要，建議無菌過濾。有效期3年，避免反復(fù)凍融。

條件	最佳濃度范圍	有效濃度范圍
Mg2+	1 - 2 mM	1 - 10 mM
pH	8.0 - 9.0	6.0 - 10.0
溫度	37℃	0 - 42℃
DTT	0 - 100 mM	> 100 mM
β-ME	0 - 100 mM	> 100 mM
Na+, K+,etc	0 - 20 mM	0 - 150 mM
PO43-	0 - 10 mM	0 - 100 mM

最佳條件定義為酶活性保留90%以上的反應(yīng)條件；有效條件定義為酶活性保留15%以上的反應(yīng)條件。

Benzonase的抑制條件：

本產(chǎn)品可被一定的鹽濃度抑制活性，例如： > 100 mM的一價(jià)陽(yáng)離子(如Na+、K+等)， > 10 mM的二價(jià)Ca2+離子， > 100 mM的鹽酸胍(guani-dine HCl)， > 20 mM的磷酸鹽(phosphate)， > 25 mM的硫酸銨(ammonium sulfate)等，可抑制該酶50%左右活性。

此外，螯合劑也可通過螯合體系中的Mg2+以達(dá)到抑制酶活的作用，通過加入更多Mg2+可恢復(fù)Benzonase的活性(1 mM的EDTA可部分抑制Benzonase活性，5 mM的EDTA可使其活性喪失約90%)。1 - 2 mM Mg2+離子對(duì)于此酶活性的保持至關(guān)重要。