瀏覽量: 114
- 產(chǎn)品名稱: DNA膠回收試劑盒
- 產(chǎn)品貨號: CSHZDGEK200-I
- 貨期: 現(xiàn)貨
- 價格與訂購: 1200
- 數(shù)量:
- 規(guī)格: 200T
- 產(chǎn)品信息
- 如何訂購
產(chǎn)品介紹
本試劑盒采用可以高效、專一結(jié)合DNA 的硅基質(zhì)材料和獨特的緩沖液系統(tǒng),從TAE 或TBE 瓊脂糖凝膠上回收100bp-30kbDNA 片段,有機(jī)化合回收率高達(dá)80%,每個離心吸附柱每次可吸附的DNA 量為10 μg同時除去蛋白質(zhì)、其它雜物、無機(jī)鹽離子及寡核苷酸引物等雜質(zhì)。
產(chǎn)品特點
快速:整個操作過程快速方便,十幾分鐘即可完成回收工作。
多樣:可以回收單鏈、雙鏈DNA 片段以及環(huán)狀質(zhì)粒DNA。
高效:可以高效回收目的DNA。
內(nèi)裝
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 用途 | 儲存條件 |
MTB溶液 | 160ml | 溶膠 | 25-30℃可保存6個月 |
CB溶液 | 40ml | 漂洗,脫鹽(使用前加入160ml無水乙醇) | 25-30℃可保存6個月 |
EB溶液 | 6ml | 洗脫DNA | 25-30℃可保存6個月 |
NB溶液 | 1ml | 調(diào)節(jié)溶膠后溶液pH值 | 25-30℃可保存6個月 |
吸附柱 | 200個 | 結(jié)合DNA | 干燥避光下保存12個月 |
收集管(2ml) | 200個 | 收集吸附柱離心后的液體 | 干燥避光下保存12個月 |
所有溶液應(yīng)該是澄清的,如果環(huán)境溫度低 溶液靜置時間久,可能會有沉淀形成,屬于正?,F(xiàn)象,使用前可在37℃水浴中溫浴5-10分鐘。
操作步驟
1在紫外燈下,用干凈刀片將所需回收的DNA條帶切下,盡量切除多余部分,得到的凝膠體積越小越好。
注意:電泳時最好選用新的TAE電泳緩沖液;紫外燈下切膠時間不宜過長。
2.將切下的含有DNA條帶的凝膠放入15ml離心管中,加入750ulMTB溶液,55℃水浴或金屬浴放置10-15分鐘,每隔5分鐘上下顛倒數(shù)次,以確保膠塊充分溶解。
注意:如果膠塊體積過大,可將膠塊切碎;溶膠后,若溶液的顏色變?yōu)榻奂t色或紫色,應(yīng)加入5-10ulNB溶液,使其變回淡黃色;對于回收的DNA片段<500bp時,待膠塊完全溶解,可加入同等膠塊體積的異丙醇,上下顛倒混勻后再過吸附柱,有利于提高DNA回收率。
3.將上一步所得溶液加入到已裝入收集管的吸附柱中,室溫12000rpm離心1分鐘,棄掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
注意:吸附柱容積為800ul,溶膠后溶液體積大于800ul可分兩次加入。
4.向吸附柱中加入500ulCB溶液(使用前加入無水乙醇),室溫12000rpm離心1分鐘,棄掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
注意:如果純化的DNA用于鹽敏感的實驗,建議加入CB溶液后靜置2分鐘再離心。
5.重復(fù)步驟4一次。
注意:此步驟目的是洗去吸附柱上的鹽和其他離子,不應(yīng)省略。
6室溫12000rpm離心2分鐘,徹底去除吸附柱中的漂洗液,丟棄收集管,將吸附柱置于一個新的離心管中。
7開蓋室溫靜置5分鐘,向吸附柱中間部位的吸附膜滴加15-25ulEB溶液。
8.扣蓋室溫靜置5分鐘,室溫12000rpm離心2分鐘,將DNA溶液收集至離心管中。
注意:可將收集的DNA溶液再次加入至吸附柱中離心,也可將EB溶液溫浴至70℃后再進(jìn)行洗脫,以提高DNA的回收率;洗脫液的pH值會影響洗脫效率,若用ddH2O洗脫,應(yīng)確保其pH值在7.0-8.5范圍內(nèi)。
DNA的檢測
實驗室常用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測回收的DNA片段純度。測DNA濃度時,OD/OD比值應(yīng)在1.7-19范圍內(nèi),1.8為最佳。
Note
For research use only .
上一篇 ELISA單組分TMB底物