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  • 產(chǎn)品名稱： Rac Activation Assay Kit
  • 產(chǎn)品貨號(hào)： 80501
  • 貨期： 現(xiàn)貨
  • 價(jià)格與訂購(gòu)： 6800
  • 數(shù)量：
    庫(kù)存： 5
  • 規(guī)格： 96T
  • 產(chǎn)品信息
  • 如何訂購(gòu)
    產(chǎn)品說(shuō)明
     小 G 蛋白是從屬于細(xì)胞調(diào)節(jié)因子中的一個(gè)超家族。Rho 家族是小 G 蛋白中的一個(gè)亞家族，它在細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、細(xì)胞分裂以及基因轉(zhuǎn)錄中發(fā)揮主要作用。而本試劑盒中的 RhoA 就屬于Rho 亞家族中的一種， RhoA 參與生理活動(dòng)過(guò)程中其分子結(jié)構(gòu)會(huì)呈現(xiàn)出 2 種相互轉(zhuǎn)換的形式：與 GTP 結(jié)合的激活狀態(tài)和與 GDP 結(jié)合的非活性狀態(tài)。
        目前RhoA蛋白活性的檢測(cè)主要是依據(jù)小GTP酶RhoA可以與RhoA效應(yīng)蛋白(Rhotekin)的 RBD 區(qū)域結(jié)合，使 RhoA 效應(yīng)蛋白活化從而發(fā)揮生物學(xué)功能，進(jìn)而間接的進(jìn)行 RhoA 活性功能的監(jiān)測(cè)。然而此方法在檢測(cè)過(guò)程中存在著一定的局限性比如 GTP 水解成 GDP 的速度過(guò)快以及 RhoA-GTP 結(jié)合蛋白與 RBD 結(jié)合區(qū)域之間較低的親和力，導(dǎo)致這種檢測(cè)方法的重復(fù)性較差。
       RhoA 活性檢測(cè)試劑盒主要是依據(jù)單克隆抗體能夠特異性的識(shí)別特殊構(gòu)象的 RhoA-GTP 結(jié)合蛋白，而不識(shí)別 RhoA-GDP 結(jié)合蛋白，進(jìn)而簡(jiǎn)單并且快速的進(jìn)行 RhoA 的活性檢測(cè)。同時(shí)試劑盒中的 RhoA-GTP 單克隆抗體也可以進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞和組織中 RhoA 的活性監(jiān)測(cè)。每套試劑盒可以進(jìn)行 20 次檢測(cè)。檢測(cè)原理
        RhoA 活性檢測(cè)試劑盒主要是利用識(shí)別蛋白特異構(gòu)象的 RhoA-GTP 單克隆抗體特異性的去檢測(cè)細(xì)胞提取物或者體外的（樣品需要進(jìn)行 GTPγS 活化處理）活性 RhoA-GTP 的水平。簡(jiǎn)言之，特異性識(shí)別 RhoA 活化構(gòu)象的鼠單克隆抗體可以特異性結(jié)合細(xì)胞裂解液中的 RhoA-GTP 活性蛋白，然后利用 protein A/G 將抗原抗體的結(jié)合物吸附下來(lái)，再利用特異性識(shí)別 RhoA 活化構(gòu)象的兔多克隆抗體進(jìn)行免疫印跡分析進(jìn)行檢測(cè)。
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    試劑盒成分
    1. 特異性識(shí)別 RhoA 活性構(gòu)象的鼠單克隆抗體（Anti active RhoA, Mouse Monoclonal  Antibody (Catalog No. 26904)）：小管裝--30ul (抗體濃度是 1mg/ml)，抗體溶于 PBS（pH7.4）并包含 50%的甘油和 0.05%的疊氮化鈉。此抗體可以特異性識(shí)別所有脊椎動(dòng)物中的  RhoA-GTP。
    2. Protein A/G agarose (Catalog No. 30301) ：小管裝—400ul 包含 200ul Protein A/G agarose和 200ul 20%乙醇溶液。（使用時(shí)溶液需要充分混勻，再吸?。?/div>
    3. 5X Assay/Lysis Buffer (Catalog No. 30303)：小瓶裝—30mL 包含 250 mMTris-HCl (pH8.0),750 mM NaCl, 50 mM MgCl2, 5 mM EDTA, 5% Triton X-100。
    4. 特異性識(shí)別 RhoA 活性構(gòu)象的兔多克隆抗體（Anti RhoA, Rabbit Polyclonal Antibody
        (Catalog No.21009)）：小管裝--30ul (抗體濃度是 1mg/ml)，抗體溶于 PBS（pH 7.4包含有 50%的甘油。
    5. 100 X GTPγS (Catalog No. 30302) ：小管裝—100ul (10 mM) ，實(shí)驗(yàn)中 0.5mL 細(xì)胞裂解液使用 5ul GTPγS 標(biāo)記。
    6. 100 X GDP (Catalog No. 30304) ：小管裝—100ul (100 mM) ，實(shí)驗(yàn)中 0.5mL 細(xì)胞裂解液使用 5ul GDP 標(biāo)記。
    儲(chǔ)存條件
    試劑盒的成分在試劑盒的有效期限內(nèi)必須存放于 4°C 條件下保存。
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    Storage
    Store all kit components at 4oC until their expiration dates. 
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    Note
    For Research Use Only.