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腸激酶（Enterokinase, EK）是一種高度專一性識(shí)別 Asp-Asp-Asp-Asp-Lys 序列的蛋白酶，在 Lys 的 C 端水解多肽。具有高度專一性，水解效率高的特點(diǎn)。可在較寬的 pH 范圍(4.5~9.5)和較寬溫度范圍內(nèi)有效切割 融合蛋白。可除去位于蛋白質(zhì) N-末端的融合蛋白，以除去不需要的融合標(biāo)簽。 重組腸激酶采用重組畢赤酵母高效分泌表達(dá)技術(shù)，經(jīng)多級層析純化，制成的高純度、高活性重組牛腸激酶，不含其他蛋白酶。

無動(dòng)物源性：無動(dòng)物病毒、無致病物質(zhì)、無外源因子污染，安全性高； 純度高，比活高。 

淡黃色、無色澄明液體

≥5.0U/μl

7.0-9.0

單一主條帶

≤100ng/mg pro.

≤100ng/mg pro.

在 25℃，12~16 小時(shí)內(nèi)，將 0.5mg 保存于 25mM Tris-HCI pH 8.0緩沖液中的融合蛋白切割 95%所需的酶量為 1U。

【25℃酶切條件為】25mM Tris-HCl PH8.0 體系中融合蛋白 0.1-1mg/ml（蛋白總量 50-100μg），重組 EK 0.1~0.2U,酶切 16~24 小時(shí)，用 SDS-PAGE 檢測酶切效果。

【4℃酶切條件為】可在 4℃對底物進(jìn)行有效低溫酶切，但需要將酶切時(shí)間延長至 48~64 小時(shí)，或增加 2-3 倍酶量。低溫酶切有時(shí)候可獲得比 25℃更好的酶切效果。 ? 在＞200mM 咪唑，或＞200mMNaCl，或＞5%甘油，酶切效果受影響。可參照以下推薦方法進(jìn)行酶切： 1） 為獲得理想酶切結(jié)果，請將樣品透析到 25mM Tris-HCl pH 8.0 緩沖液中，再進(jìn)行酶切； 2） 若不便透析，可將樣品稀釋，咪唑含量在 100mM 以下，NaCl 濃度在 50mM 以下，甘油濃度小于 5%以下進(jìn)行酶切，酶的用量與蛋白的比例不變（即 1U 酶切 500μg 蛋白）； 3） 如果樣品溶液中含有上述成分的一種或多種，且不便去除，此時(shí)適當(dāng)增加酶量或延長酶切時(shí)間，也可 達(dá)到較好酶切效果。

可對酶切條件進(jìn)行優(yōu)化，例如緩沖液 pH，融合蛋白濃度，EK 的量，以及酶切時(shí)間，融合蛋白能在穩(wěn)定條 件下被酶切，用 SDS-PAGE 檢測酶切效果。

去除重組腸激酶的辦法：可使用胰蛋白酶抑.制.劑親和層析去除重組腸激酶。 注意：不建議 37℃條件下酶切，可能會(huì)有非特異性酶切出現(xiàn)。

運(yùn)輸穩(wěn)定性：冰袋運(yùn)輸，活.性穩(wěn)定。

儲(chǔ)存穩(wěn)定性：-15℃及以下，24 個(gè)月穩(wěn)定，25℃，一周內(nèi)無活.性損失。緩沖體系：50mM Tris-HCl，pH8.0，250mM NaCl，2mMCa2+，50%甘油。

凍融穩(wěn)定性：反復(fù)凍融 5 次，無活性損失。