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  • 產(chǎn)品名稱： SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Nucleocapsid Protein檢測試劑盒
  • 產(chǎn)品貨號(hào)： CSK00013
  • 貨期： 現(xiàn)貨
  • 價(jià)格與訂購： 2880
  • 數(shù)量：
    庫存： 100
  • 規(guī)格：
  • 產(chǎn)品信息
  • 如何訂購
    產(chǎn)品名稱（Product Name）
    SARS-CoV-2 (2019-nCoV) Nucleocapsid Protein檢測試劑盒
    貨號(hào)（Catalog#）
    CSK00013
    產(chǎn)品描述（Description）
    本試劑盒采用雙抗夾心ELISA定量分析技術(shù)，將抗Nucleocapsid蛋白兔多克隆抗體預(yù)先包被在酶標(biāo)板上，之后將標(biāo)準(zhǔn)品或分析樣本加入到微孔中，樣本中Nucleocapsid蛋白會(huì)被預(yù)包被的抗體捕獲，清洗掉未結(jié)合的物質(zhì)后，將生物素標(biāo)記的抗Nucleocapsid蛋白單克隆抗體加入到微孔中反應(yīng)，形成夾心復(fù)合物，再加入HRP標(biāo)記的鏈霉親和素，清洗掉未結(jié)合的抗體及酶試劑之后，將顯色液添加到微孔中顯色，顯色強(qiáng)度與樣品中Nucleocapsid蛋白濃度成正比。
    本試劑盒用于測定支氣管肺泡灌洗液、鼻咽拭子樣本或重組表達(dá)樣本中Nucleocapsid蛋白的濃度。
    穩(wěn)定性&儲(chǔ)存（Stability &Storage）
    收到試劑盒后請(qǐng)將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液 A、檢測溶液 B 以及預(yù)包板保存于-20℃，封板膜放置于常溫保存,其余試劑請(qǐng)置于 4 ℃保存?zhèn)溆谩?/span>
    試劑盒按推薦溫度保存6個(gè)月，信號(hào)強(qiáng)度降低小于 10%。
    運(yùn)輸方式（Shipping）
    藍(lán)冰運(yùn)輸
    使用方法（Standard Operating Procedure）
    所需設(shè)備及試劑
    450 nm濾光片酶標(biāo)儀，含540 nm或570nm校正波長更佳
    單道或多道微量移液器，移液器槍頭
    去離子水
    500 mL量筒
    樣品稀釋管或不同規(guī)格EP管
    吸水紙
     
    一、試劑準(zhǔn)備
    使用前將所有試劑和樣本置于室溫平衡。
    1. 20×濃縮清洗液：如果濃縮清洗液中有晶體析出，平衡至室溫并搖勻，直到晶體完全溶解，25mL濃縮清洗液使用去離子水定容至500mL，得到清洗液。
    2. 用2mL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本稀釋液溶解Nucleocapsid蛋白標(biāo)準(zhǔn)品凍干粉，溶解后標(biāo)準(zhǔn)品濃度為80ng/mL。輕輕混勻后靜置10分鐘，然后進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋, 準(zhǔn)備 7 個(gè)稀釋標(biāo)準(zhǔn)品的 EP 管，每個(gè) EP 管中加入500μL的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液，依次倍比稀釋成 80ng/mL、 40ng/mL、20ng/mL、 10ng/mL、 5ng/mL、2.5 ng/mL、 1.25ng/mL, 標(biāo)準(zhǔn)品/樣本稀釋液（0ng/mL）直接作為空白孔。
    3. 檢測溶液A（生物素標(biāo)記）：臨用前震蕩混勻后用掌上離心機(jī)瞬時(shí)離心，使液體集中于管底，使用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度。
    4. 檢測溶液B（HRP標(biāo)記）：臨用前震蕩混勻后用掌上離心機(jī)瞬時(shí)離心，使液體集中于管底，使用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度。
    5. 顯色液：避光保存，顯色時(shí)100μL /孔。
    6. 終止液：顯色完畢后50μL /孔。
     
    二、實(shí)驗(yàn)步驟
    使用前將所有試劑和樣本置于室溫，建議對(duì)所有標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品和樣本進(jìn)行一式兩份的分析。
    1. 按照前面章節(jié)的指示準(zhǔn)備所有試劑和樣本。
    2. 從板架上取下多余的微孔板條，將其放回裝有干燥劑包的鋁箔袋中，然后重新密封保存于-20℃。
    3. 每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，用封板膜封住，37℃孵育60分鐘。
    4. 棄去孔內(nèi)液體，每孔加入 300μL的清洗液，輕微震蕩后棄去孔內(nèi)液體，將酶標(biāo)板倒扣在吸水紙上輕拍，使殘留在孔內(nèi)的液體全部去除，重復(fù)洗板 3 次，此過程也可采用尖嘴噴射瓶，多道移液器或自動(dòng)洗板機(jī)來完成。
    5. 每孔加入100μL檢測溶液A（生物素標(biāo)記），用新的封板膜封住，37℃孵育30分鐘。
    6. 重復(fù)步驟4中的洗板程序。
    7. 每孔加入100μL檢測溶液B（HRP標(biāo)記），用新的封板膜封住，37℃孵育30分鐘。
    8. 重復(fù)步驟4中的洗板程序。
    9. 每孔加入100μL顯色液，37℃避光顯色5-10分鐘。
    10. 每孔加入50μL終止液，孔里的顏色應(yīng)該由藍(lán)色變至黃色，如果孔內(nèi)顏色為綠色或顏色變化不均勻，輕輕震動(dòng)酶標(biāo)板使顏色均一。
    11. 擦干酶標(biāo)板底部水氣，立刻用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測量各孔的O.D.值，如果波長校正可用，則設(shè)置為540 nm或570 nm，如果波長校正不可用，則從450 nm的讀數(shù)中減去540 nm或570 nm的讀數(shù)，這種修正可去除酶標(biāo)板讀數(shù)中的光學(xué)偏差，如果沒有校正波長，可直接讀取450 nm的讀數(shù)，但讀值有可能不準(zhǔn)確。
     
    三、標(biāo)準(zhǔn)曲線制作
    每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣本的復(fù)孔平均O.D.值，減去空白孔平均O.D.值后，以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，O.D.值為縱坐標(biāo)，繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線（R2值越趨近于1曲線越精確），然后再將樣本的平均O.D.值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，計(jì)算出樣品濃度。
    如果樣品已經(jīng)稀釋，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上算出的濃度需乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
     
    四、標(biāo)曲案例
    標(biāo)準(zhǔn)曲線僅用于演示，每次實(shí)驗(yàn)均需生成單獨(dú)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

    五、檢測范圍
    1.25ng/mL—80ng/mL
     
    六、最低檢測限(MDD)
    ＜1ng/mL
    MDD是測試20個(gè)零標(biāo)準(zhǔn)（標(biāo)準(zhǔn)品/樣本稀釋液）的平均O.D.值上加兩倍標(biāo)準(zhǔn)差后計(jì)算相應(yīng)的濃度來確定的。
     
    七、精密度
    批內(nèi)差： CV<12%
    批間差： CV<15%
     
    八、穩(wěn)定性
    試劑盒按推薦溫度保存6個(gè)月，信號(hào)強(qiáng)度降低小于10%。
    組分和說明（Component and Instruction）

    樣品清單及儲(chǔ)存條件

    樣品名稱

    規(guī)格

    描述

    推薦儲(chǔ)存條件

    預(yù)包板

    1 板

    96孔聚苯乙烯微孔板（12條*8孔），預(yù)包被抗Nucleocapsid蛋白兔多克隆抗體

    密封狀態(tài)放置于-20℃保存

    標(biāo)準(zhǔn)品

    1 瓶

    160ng重組Nucleocapsid蛋白凍干粉（含防腐劑），臨用前復(fù)溶于2mL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本稀釋液，終濃度為80ng/mL

    放置于-20℃保存

    檢測溶液A

     

    1 瓶

    120μL 生物素標(biāo)記的抗Nucleocapsid蛋白單克隆抗體（含防腐劑），臨用前用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度

    放置于-20℃保存

    檢測溶液B

     

    1 瓶

    120μL HRP標(biāo)記的鏈酶親和素（含防腐劑），臨用前用檢測溶液稀釋液1:100稀釋至工作濃度

    放置于-20℃保存

    標(biāo)準(zhǔn)品/樣本稀釋液

    1 瓶

    25 mL稀釋液（含防腐劑），用于標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣本的稀釋

    放置于4℃保存

    檢測溶液稀釋液

    1 瓶

    25 mL稀釋液（含防腐劑），用于檢測溶液A和檢測溶液B的稀釋

    放置于4℃保存

    濃縮清洗液

    1 瓶

    25 mL （20×）濃縮清洗液（含防腐劑），臨用前用去離子水1:20稀釋至工作濃度

    放置于4℃保存

    顯色液

    1 瓶

    12 mL TMB（四甲基聯(lián)苯胺）

    放置于4℃保存

    終止液

    1 瓶

    6 mL

    放置于4℃保存

    封板膜

    4 片

    用于實(shí)驗(yàn)中封閉酶標(biāo)板

    放置于常溫保存

    在試劑盒保質(zhì)期內(nèi)使用

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    Note
    For research use only .