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  • 產(chǎn)品名稱: 藻紅蛋白抗體快速標(biāo)記試劑盒
  • 產(chǎn)品貨號: CSL0022K-1
  • 貨期: 現(xiàn)貨
  • 價格與訂購: 2800
  • 數(shù)量:
    庫存: 100
  • 規(guī)格: 一盒
  • 產(chǎn)品信息
  • 如何訂購

    產(chǎn)品介紹:

    藻紅蛋白(R-phycoerythrin ,R-PE)是從紅藻中分離提純的一種熒光蛋白,最大激發(fā)波長為565nm,最大熒光發(fā)射峰為575nm。由于其吸光度和熒光量產(chǎn)率很高,熒光強而穩(wěn)定,靈敏度高備受免疫檢測標(biāo)記領(lǐng)域青睞。R-PE蛋白的亞基組成為(αβ)6γ,每個α、β亞基分子量為20KDa,每個γ亞基分子量為30KDa,總分子量為240kDa。目前還沒有辦法通過重組蛋白表達量產(chǎn),只能從紅藻中提取,因此其生產(chǎn)成本制約其廣泛使用。

    基本原理:

    本試劑盒利用抗體和R-PE上游離的氨基,采用定向?qū)优悸?lián)技術(shù)將抗體分子與R-PE共價偶聯(lián),本試劑盒采用加長臂方案,使被標(biāo)記抗體與熒光蛋白之間有一定長度柔性連接臂,避免由于位阻妨礙抗體活性或者熒光蛋白發(fā)光效率。

    主要特點:

    ü  試劑盒組分齊全,操作簡單,只要按照操作步驟進行便可得到高品質(zhì)R-PE標(biāo)記抗體;

    ü  本試劑盒所配置的R-PE為高純度,高活性熒光蛋白,熒光發(fā)光效率更高;

    ü  本試劑采用定向偶聯(lián)技術(shù),熒光蛋白和抗體都不會發(fā)生自連,保證偶聯(lián)物的特異性和均一性;

    ü  試劑盒所使用的交聯(lián)劑增加了延長臂,確保不會因為蛋白質(zhì)位阻而影響發(fā)光效率;

    ü  鑒于R-PE的蛋白骨架特性,其抗淬滅能力更強。

                                                 

     

     

     

     

     

     

     

    試劑盒已經(jīng)提供材料:

    ü  活化R-PE蛋白    1mg  可用于標(biāo)記0.3-0.5mg抗體

    ü  標(biāo)記緩沖液     30ml

    ü  抗體修飾試劑    30ul*1支

    ü  30KMWCO超濾管   2支

    ü  封閉試劑      1支(臨用前加DMSO 5ul)

    ü  DMSO溶劑      200ul*1支

    ü  說明書       1份

    其他需要自備試劑材料:

    2  待標(biāo)記的生物分子;

    2  移液器及吸頭;

    2  去離子水。

    試劑盒儲存

    試劑盒中抗體修飾試劑封閉試劑放在-20?C,其余組分放在2-8可保存6個月以上。

    試劑盒操作流程:

    1.抗體的修飾

    1)取待標(biāo)記抗體(純度>90%),用標(biāo)記緩沖液調(diào)整濃度到 5mg/ml左右為宜,按照每mg抗體加入2μl 抗體修飾試劑,輕輕混勻,在室溫下避光晃動反應(yīng) 90分鐘;

    2)反應(yīng)完畢后,將其轉(zhuǎn)入30KMWCO超濾管,用標(biāo)記緩沖液超濾3次(每次管芯殘留液體不超過原始液量1/4),得到修飾抗體

    2.活化R-PE蛋白與抗體偶聯(lián)

    1)用標(biāo)記緩沖液復(fù)溶活化R-PE蛋白,濃度調(diào)整為5mg/ml;

    2)將修飾抗體活化R-PE蛋白,按照質(zhì)量比1:3比例(每mg修飾抗體對應(yīng)3mg活化R-PE蛋白)混合,室溫避光反應(yīng)2小時;

    3)將封閉試劑管中加入5ul DMSO,;按照每0.5mg抗體5ul比例用量加入步驟2)反應(yīng)產(chǎn)物中,封閉未反應(yīng)完的活性基團;

    4)標(biāo)記好的抗體分裝,加入適當(dāng)保護劑,-20保存?zhèn)溆谩?/span>