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- 產(chǎn)品名稱： 小鼠單克隆抗體Ig類/亞類/亞型鑒定ELISA試劑盒
- 產(chǎn)品貨號： CSC060101-L
- 貨期： 現(xiàn)貨
- 價格與訂購： 2400
- 數(shù)量：
庫存： 5
- 規(guī)格： 盒
- 產(chǎn)品信息
- 如何訂購
試劑原理
本試劑盒利用雙抗體夾心法鑒定小鼠淋巴細(xì)胞雜交瘤培養(yǎng)上清中單克隆抗體或特異親和純化單克隆抗體的類和亞類（可區(qū)分出IgG1\IgG2a\IgG2b\IgG3\IgM\IgA\Kappa\Lambda）。采用小鼠抗體共有位點的二抗包 被微孔板，與加入的培養(yǎng)上清中的小鼠抗體結(jié)合，再加入HRP標(biāo)記的抗小鼠各類、亞類、亞型的抗體來分別反應(yīng)， 隨后用TMB底物系統(tǒng)顯色并用稀硫酸終止，再通過酶標(biāo)儀檢測吸光度來判斷被測單克隆抗體的類或亞類。本 試劑盒具有極高的分辨率，是您鑒定小鼠單克隆抗體類、亞類、亞型的可靠工具。
試劑組份
| 酶標(biāo)板 含自封袋2個 | 2ⅹ96孔 | 標(biāo)本稀釋液 | 15ml |
| 通用陽性對照 | 1.8ml | 顯色劑A | 15ml |
| 通用陰性對照 | 1.8ml | 顯色劑B | 15ml |
| 酶標(biāo)二抗 8種 | 6×3.2ml | 反應(yīng)終止液 | 15ml |
| 20×清洗液 | 50mL | 加樣圖 | 2份 |
| 封板膜 | 4張 | 說明書 | 1份 |
使用范圍
用于培養(yǎng)上清中小鼠單克隆抗體Ig類、亞類、亞型的鑒定以及相關(guān)內(nèi)容的研究。
使用方法
1、首先將試劑盒恢復(fù)室溫（大約30分），然后用純水把清洗液配成工作濃度（一份濃縮清洗液加19份純水）。
2、取出酶標(biāo)板。每個標(biāo)本需要8孔，陽性對照8孔，陰性對照8孔。多余的用自封袋保存，記得放入干燥劑。
3、將標(biāo)本檢測孔每孔先加入標(biāo)本稀釋液各50μl。然后將50μl細(xì)胞培養(yǎng)上清（或特異親和純化的抗體）再加入酶標(biāo)微 孔板，每個標(biāo)本加8孔；陽性對照和陰性對照各8孔每孔100μl此處不加標(biāo)本稀釋液。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
4、棄去板內(nèi)液體，手工洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干（或機(jī)洗5遍）。再在每個標(biāo)本的6孔中分別加入8種 酶標(biāo)二抗各100μl，通用陽性、陰性對照的各孔也一樣。在加樣圖上或酶標(biāo)板上做好標(biāo)記。貼上封板膜37℃溫育30分鐘。
5、吸棄板內(nèi)液體，手工洗板5遍后在不掉纖維的吸水材料上拍干（或機(jī)洗5遍）。每孔分別加入顯色劑A和顯色劑B各50μl，換一張新的封板膜貼板避光37℃顯色20分鐘。
6、本試劑盒特異性好一般肉眼即可觀察出結(jié)果，看顯色藍(lán)的那個孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類。更可將反應(yīng)終止液（每孔50μl）終止反應(yīng)后用酶標(biāo)儀450nm測定波長，630nm參考波長雙波長測定結(jié)果，參看高值孔所對應(yīng)的酶標(biāo)二抗就知道此標(biāo)本的Ig類或亞類亞型(陽性對照OD一般不小于0.8，陰性對照一般不高于0.15，陽性判定標(biāo)準(zhǔn)：樣品OD大于陰性O(shè)D+0.15，陰性O(shè)D低于0.05按0.05算)。
產(chǎn)品特點
高靈敏度、高特異性、結(jié)果容易判定。
保存條件
不開啟2-8℃避光保存效期一年。不正確存放或過于頻繁開啟使用有可能因此使效期縮短。
注意事項
1、雖然本試劑盒過期后很久還有使用價值但還是請您在標(biāo)簽注明的有效期內(nèi)使用。
2、在檢測腹水類單抗時要稀釋到1/5萬，雖然可以分辨但并不建議您這樣做。此類樣品成分十分復(fù)雜，有干擾結(jié)果的可能。在此種情況下您可以選擇本公司的貨號為C060102-L的鑒定試劑。它會給您帶來滿意的結(jié)果,同時您也可以使用抗原包被板替換試劑盒內(nèi)的包被板來解決此類問題，但這種情況下陽性對照不顯色屬于正常。
3、手洗板子時一定要把孔加滿，停留10秒然后棄盡，甩干凈。特別是在酶標(biāo)二抗溫育后洗板時一定要把酶吸出而不是甩出，要吸凈。這個在手工洗板時對結(jié)果很重要。
4、一次沒用完的板子要帶干燥劑放自封袋封好，隨盒存放。
5、拿放板子時不要劇烈抖動，以免孔間交叉污染出現(xiàn)錯誤結(jié)果。
6、本試劑一般不會出現(xiàn)兩個陽性，但出現(xiàn)兩個陽性的現(xiàn)象現(xiàn)實中是真實存在的，一般會一個OD很高,另一個很低但卻還能判為陽性，實驗分析表明這種情況下以O(shè)D高值孔為準(zhǔn)，出現(xiàn)這種情況有多重原因：A、培養(yǎng)的細(xì)胞中有“飼養(yǎng)細(xì)胞”殘留，B、由于單抗研制存在人工干預(yù)步驟因此抗體本身有可能會存在亞類結(jié)構(gòu)上的輕微變異， C、樣品為非特異親和純化的抗體或樣品是腹水，D、上清出現(xiàn)少量污染，E、實驗操作粗放，F(xiàn)、加錯試劑。
特別提示
不具備ELISA基礎(chǔ)知識和操作的人員不要完成此實驗或類似實驗，因為這可能會給您帶來錯誤的結(jié)果和不必要的損失，實驗中有疑問請聯(lián)系我們技術(shù)團(tuán)隊
Note
For research use only .
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